1，生物汙染(rǎn)的檢測(cè)采(cǎi)樣(yàng)儀器(qì)的選擇原則(zé)
（1）了解(jiě)與分析所(suǒ)需采樣的(dí)活性(xìng)粒子的(dí)類(lèi)型(xíng)
由(yóu)於不(bù)同微生物自身的粒徑(jìng)不等，生(shēng)存(cún)形(xíng)態各異，有效的(dí)載(zǎi)體(tǐ)不(bù)同等等，這(zhè)些區別(bié)與差(chà)異都會影(yǐng)響采樣方(fāng)法(fǎ)和采(cǎi)樣儀(yí)器(qì)的選(xuǎn)擇(zé)
。因此，必須有(yǒu)針(zhēn)對性(xìng)的選擇采樣儀器方能獲(huò)得可(kě)靠的測量值(zhí)，在這一點(diǎn)上(shàng)與空(kōng)氣(qì)中懸浮(fú)微(wēi)粒的檢測相(xiāng)比顯(xiǎn)得更為(wéi)復雜(zá)
。
（2）該(gāi)活(huó)性粒子(zǐ)對采樣方法(fǎ)的敏(mǐn)感性(xìng)
例(lì)如某(mǒu)些活粒子(zǐ)凝塊易(yì)被衝(chōng)擊采樣器的衝(chōng)擊(jī)力(lì)所破碎(suì)，造(zào)成活性粒(lì)子采樣的(dí)機(jī)械(xiè)損失(shī)而影(yǐng)響采樣效率
。對(duì)於此類活性粒子則(zé)宜避(bì)免(miǎn)選用(yòng)這類采樣方(fāng)法(fǎ)
。
（3）活粒子(zǐ)的預(yù)期濃(nóng)度
這(zhè)也(yě)是需(xū)要根據經(jīng)驗作(zuò)出(chū)預判(pàn)斷的(dí)一(yī)個(gè)方(fāng)麵，例(lì)如(rú)活(huó)粒子(zǐ)濃度很(hěn)高時，在某(mǒu)種儀(yí)器的(dí)小采(cǎi)樣量條件(jiàn)下獲(huò)得的采樣(yàng)結果，也會因(yīn)菌(jūn)落(là)重疊(dié)，難於計(jì)數，而造(zào)成(chéng)較大的檢(jiǎn)測誤差(chà)
。
（4）危險區(qū)的可(kě)達(dá)性
所(suǒ)設(shè)定(dìng)的生物汙染(rǎn)控(kòng)製危險區往(wǎng)往(wǎng)不(bù)適宜采樣或采樣的(dí)風險較(jiào)大
。例如(rú)，靠近(jìn)手(shǒu)術(shù)切(qiē)口上(shàng)方空氣的含菌濃度(dù)是空(kōng)氣(qì)環境對(duì)感染率產生影(yǐng)響(xiǎng)的(dí)敏(mǐn)感部位，而恰(qià)恰(qià)在這個(gè)部位進(jìn)行檢測采(cǎi)樣存在較多(duō)的(dí)困難與隱(yǐn)患(huàn)，可能影(yǐng)響，幹擾(rǎo)醫護(hù)人(rén)員(yuán)的操作，存在較(jiào)大的醫療事(shì)故風險(xiǎn)
。對於手術(shù)中的這(zhè)個(gè)生物(wù)汙(wū)染控(kòng)製的危險區域(yù)，采樣(yàng)儀(yí)器(qì)往往是不能進入的(dí)，即存在(zài)不(bù)可達性(xìng)的(dí)問(wèn)題
。基於這(zhè)種情況，就(jiù)要(yào)安(ān)排(pái)其它(tā)合(hé)適的檢測(cè)采(cǎi)樣位置，而(ér)該(gāi)部(bù)位的測值應是(shì)能反映危險(xiǎn)區域生(shēng)物(wù)汙染(rǎn)控製效果的
。
（5）極低(dī)程度生(shēng)物汙染的檢測(cè)能力
對(duì)於(yú)這(zhè)種情(qíng)況要事(shì)前判(pàn)定(dìng)所(suǒ)選(xuǎn)采樣(yàng)儀器是否能反(fǎn)映真(zhēn)實(shí)情況
。譬如在ISO 5級(jí)以(yǐ)上的(dí)潔(jié)淨室中，由(yóu)於空氣潔淨(jìng)度很(hěn)高，懸浮(fú)微粒(lì)稀少(shǎo)，如用(yòng)沉降平(píng)皿(mǐn)采樣，則(zé)其平(píng)皿數或(huò)沉(chén)降麵(miàn)積(jī)和暴露(lòu)時間都(dū)要大量(liáng)增加，才(cái)有可能滿足(zú)檢測概率(shuài)的(dí)要求
。否(fǒu)則，按常(cháng)規方法操作，平(píng)皿的讀值都可(kě)能(néng)為“0”，但這(zhè)並未反映(yìng)低濃度汙染(rǎn)的真實情況
。因(yīn)此，在(zài)對(duì)極低程(chéng)度(dù)生物汙(wū)染環(huán)境選(xuǎn)擇(zé)檢測(cè)儀器和方(fāng)法時(shí)，要(yào)格外重視其(qí)檢(jiǎn)測能(néng)力
。如(rú)果使(shǐ)用(yòng)其(qí)它(tā)帶吸氣(qì)動力源(yuán)的微生物采(cǎi)樣裝置(zhì)時，其采樣空氣(qì)量(liáng)，采樣持續時間也(yě)應與(yǔ)一般汙染環境不同，要依(yī)據(jù)采(cǎi)樣(yàng)概率(shuài)來(lái)分(fēn)析與計算必要(yào)的(dí)采樣空(kōng)氣(qì)量(liáng)，再決定(dìng)所選(xuǎn)儀(yí)器(qì)的單位時間采(cǎi)樣量(liáng)和(hé)采樣(yàng)時(shí)間
。
（6）采(cǎi)樣儀(yí)器對所監測工(gōng)藝或環境的影響
這(zhè)也(yě)是(shì)選擇(zé)檢(jiǎn)測(cè)儀器和檢測(cè)方(fāng)法時必(bì)須(xū)考慮的(dí)問(wèn)題(tí)
。例(lì)如某些(xiē)微生(shēng)物采樣(yàng)器噪聲較大，如果(guǒ)用於手術(shù)中(zhōng)的微生物(wù)采樣(yàng)，就要顧忌其(qí)是否(fǒu)影響，幹擾(rǎo)醫護(hù)人(rén)員(yuán)的(dí)正常操作(zuò)
。
2，采(cǎi)樣計劃的(dí)製(zhì)定(dìng)
采(cǎi)樣(yàng)計劃(huá)首(shǒu)先應(yīng)該(gāi)明確(què)所檢(jiǎn)測，監測的生物汙染控(kòng)製(zhì)區的潔(jié)淨度(dù)，生(shēng)物汙(wū)染(rǎn)控製(zhì)水平(píng)，這些(xiē)指標是依(yī)據工(gōng)作(zuò)人員的安(ān)全，保護(hù)工藝(yì)和保(bǎo)證產(chǎn)品的質(zhì)量，以及(jí)保(bǎo)障(zhàng)環(huán)境的需(xū)要來確定(dìng)的
。這些(xiē)指(zhǐ)標通常由(yóu)業(yè)主(zhǔ)，使用單(dān)位(wèi)提(tí)出
。
（1）采(cǎi)樣計劃
采樣計劃必(bì)須以正式文件的形(xíng)式(shì)確(què)定下(xià)來，以作為(wéi)生(shēng)物汙染(rǎn)檢測工(gōng)作所依據的證(zhèng)明文件(jiàn)
。此(cǐ)文(wén)件(jiàn)經業主(zhǔ)，承(chéng)包商或檢測單(dān)位(wèi)共同(tóng)認(rèn)可(kě)，並符合國內(nèi)，的相關規(guī)範
。這(zhè)個有關(guān)采(cǎi)樣(yàng)計劃的(dí)證明文件(jiàn)，對生物(wù)汙染數(shù)據的(dí)準(zhǔn)確(què)評價(jià)與(yǔ)解釋是*的
。采樣計劃(huá)中應(yīng)明確檢(jiǎn)測(cè)時(shí)該區(qū)域所處的(dí)狀(zhuàng)態
。一(yī)般情況(kuàng)下，生物汙(wū)染(rǎn)檢測是(shì)在動態(tài)條件(jiàn)下，甚(shèn)至(zhì)選(xuǎn)擇在該(gāi)區域(yù)活動頻(pín)繁的時間(jiān)段(duàn)
。當然(rán)，靜態條(tiáo)件(jiàn)下的檢測也(yě)是需(xū)要的，它(tā)能對(duì)潔淨室的(dí)設(shè)計(jì)與效(xiào)能提供有(yǒu)用(yòng)的信(xìn)息(xī)，並可(kě)作(zuò)為(wéi)運(yùn)行中(zhōng)比對的原始(shǐ)資料(liào)
。采樣(yàng)計劃(huá)文件中應(yīng)就檢(jiǎn)測(cè)狀(zhuàng)況予(yú)以(yǐ)明(míng)確規定(dìng)
。
（2）采(cǎi)樣點的(dí)選擇與數(shù)量(liáng)
除均(jūn)布(bù)測(cè)點外，危(wēi)險區域通(tōng)常(cháng)宜增點(diǎn)測點
。例如生(shēng)物(wù)潔淨手術室的手術床周圍(wéi)，一般(bān)都(dū)會額外增(zēng)設(shè)測(cè)點(diǎn)
。
1）沉(chén)降菌
我國(guó)國(guó)家(jiā)標準(zhǔn)GB/T 16293-1996《醫藥工業潔(jié)淨室(shì)（區）沉降(jiàng)菌的測試方(fāng)法(fǎ)》（2006版(bǎn)的《醫(yī)藥工(gōng)業潔淨廠(chǎng)房(fáng)設計(jì)規範(fàn)》仍遵(zūn)循此測(cè)試方(fāng)法）中關於測(cè)點的規(guī)定如下(xià)表(biǎo)
：
沉(chén)降法的少(shǎo)采樣點(diǎn)數(shù)目(mù)

注
：表(biǎo)中的(dí)麵(miàn)積(jī)，對於單(dān)向流潔淨(jìng)室(shì)，是指(zhǐ)送(sòng)風麵積(jī)
；對於非單向(xiàng)流潔(jié)淨(jìng)室是指房(fáng)間(jiān)的(dí)麵積
表(biǎo)中(zhōng)的(dí)潔淨度(dù)級別，依(yī)原(yuán)有習慣(guàn)按(àn)美國(guó)聯邦(bāng)標準(zhǔn)209的(dí)分級劃分，表中(zhōng)的(dí)英(yīng)製(zhì)100級(jí)相當ISO 5級(jí)，10000級(jí)相(xiāng)當(dāng)於(yú)ISO 7級，100000級相當於ISO 8級(jí)
。
表中所規(guī)定(dìng)的(dí)沉降菌測(cè)點(diǎn)數(shù)與(yǔ)住房(fáng)和城鄉(xiāng)建(jiàn)設部(bù)行(háng)業(yè)標準(zhǔn)JGJ 71-90 《潔(jié)淨室施(shī)工及驗(yàn)收(shōu)規範》所(suǒ)規(guī)定的空氣中(zhōng)懸浮微粒采(cǎi)樣的低采(cǎi)樣點數(shù)是(shì)*一致(zhì)的
。
工(gōng)作(zuò)區(qū)采(cǎi)樣點(diǎn)的(dí)位置(zhì)，一般略(lüè)高於(yú)工作麵(miàn)，即離地(dì)0.8～1.5m
。
在關鍵設備或關鍵活動範圍處(chǔ)可增(zēng)加(jiā)采樣點
。
根(gēn)據ISO 14644-1的(dí)規(guī)定，空氣中懸浮微(wēi)粒(lì)測定(dìng)的采(cǎi)樣點數較(jiào)之(zhī)大(dà)為削(xiāo)減，至(zhì)於沉(chén)降菌的(dí)測(cè)點數是否(fǒu)參(cān)照現行(háng)標準執行(háng)，尚有待(dài)研究(jiū)決定
。尤(yóu)其是在動態條(tiáo)件下按國內(nèi)現行標準(zhǔn)進行(háng)沉(chén)降(jiàng)菌的監(jiān)測，表中(zhōng)所(suǒ)列測點數對於麵(miàn)積(jī)較大(dà)的(dí)高(gāo)級別生物潔(jié)淨室，在(zài)實施(shī)時(shí)困難(nán)是(shì)較(jiào)大的(dí)
。
2）浮遊(yóu)菌
我國國(guó)家標準GB/T 16294-1996《醫藥工(gōng)業(yè)潔淨(jìng)室(shì)（區）浮遊菌的(dí)測(cè)試方法》中（2006版(bǎn)的(dí)《醫藥(yào)工業潔淨(jìng)廠房(fáng)設計(jì)規範》仍(réng)遵循(xún)此測(cè)試方法）關(guān)於測(cè)點(diǎn)的規定如(rú)下(xià)表(biǎo)所(suǒ)列，表中區(qū)別驗證(zhèng)與監(jiān)測(cè)兩種不(bù)同(tóng)情況(kuàng)給(gěi)出了不同的(dí)采樣點數
。
浮遊菌測試的少采樣(yàng)點(diǎn)數(shù)目

注(zhù)
：1，表(biǎo)中的麵(miàn)積，對於(yú)100級(jí)的單(dān)向流(liú)潔淨室(shì)，包(bāo)括(kuò)層流工作台，指的(dí)是送風口(kǒu)表麵(miàn)積(jī)
；對於(yú)10000級(jí)，100000級的(dí)非(fēi)單向(xiàng)流潔(jié)淨室，指的(dí)是房間麵積
。
    2，日常監(jiān)測(cè)的(dí)采(cǎi)樣(yàng)點數(shù)目由生(shēng)產工藝的(dí)關鍵操作點(diǎn)來確(què)定(dìng)
。
浮(fú)遊菌(jūn)采(cǎi)樣測點的位置一般離地麵(miàn)0.8～1.5m
。送(sòng)風口(kǒu)測點位(wèi)置一般(bān)距(jù)出(chū)風麵0.3m左右(yòu)，測點位置(zhì)也宜離(lí)開汙(wū)染(rǎn)較集中(zhōng)的(dí)回風口1m以上
。對於(yú)關鍵設備(bèi)與關鍵工(gōng)作活(huó)動範圍處宜增(zēng)加測(cè)點數
。
3）采(cǎi)樣點均布方(fāng)法
對於均(jūn)布(bù)采(cǎi)樣(yàng)點的布置方法(fǎ)，GB/T 16293-1996和GB/T 16294-1996還(huán)提供了一些(xiē)測點布(bù)置圖供參考
：

國家標(biāo)準GB 50333-2002《醫院(yuàn)潔淨手(shǒu)術(shù)部(bù)建築(zhù)技術規範》關(guān)於(yú)不同(tóng)級(jí)別手(shǒu)術(shù)室(shì)監(jiān)測(cè)時的(dí)測點數與位置如下(xià)表所列(liè)
。無(wú)論(lùn)是塵粒數，浮遊菌(jūn)，沉(chén)降菌采(cǎi)樣，均(jūn)按下表執行
。

手術室(shì)麵(miàn)積(jī)一般在20～60m²範圍(wéi)，通(tōng)常是(shì)高(gāo)級別的麵積較大，低(dī)級(jí)別的麵積(jī)稍小(xiǎo)
。以(yǐ)單位麵積(jī)的(dí)測點(diǎn)數推(tuī)算，上表所(suǒ)列(liè)采(cǎi)樣點數(shù)與國內現(xiàn)行的(dí)其(qí)它(tā)標準基本(běn)一致
。
3，采樣(yàng)量的(dí)要求(qiú)
采樣量偏小可能(néng)提(tí)供不了具有(yǒu)代表性(xìng)的(dí)結果，過大的(dí)采樣量又(yòu)將增(zēng)加(jiā)工作量，降低工作效率，國標GB/T 16293，GB/T16294分別作出了一(yī)些(xiē)規定，可供(gōng)參(cān)考(kǎo)
。
（1）沉降菌
GB/T16294-1996對於沉降菌的(dí)培養皿數有如下規定(dìng)
：在滿(mǎn)足所規(guī)定的少(shǎo)測點數(shù)的同(tóng)時(shí)，還(huán)宜滿足所規(guī)定的少(shǎo)培(péi)養(yǎng)皿數(shù)，如(rú)下(xià)表(biǎo)所列
：
國(guó)家標準GB 50333-2002《醫院(yuàn)潔(jié)淨(jìng)手術(shù)部建築技術規範》對沉(chén)降菌測(cè)試少培(péi)養皿數規定(dìng)如下(xià)表所(suǒ)列
：

（2）浮(fú)遊菌(jūn)
GB/T 16293-1996關於(yú)浮(fú)遊菌檢測時，根據(jù)日(rì)常(cháng)監測(cè)與環(huán)境(jìng)驗證(zhèng)的不同(tóng)情況(kuàng)，給出(chū)了每(měi)次(cì)小采(cǎi)樣(yàng)量的(dí)規定值，如下(xià)表(biǎo)所列(liè)
：

國家(jiā)標(biāo)準GB 50333-2002《醫院(yuàn)潔淨手(shǒu)術(shù)部(bù)建築技(jì)術(shù)規範(fàn)》對懸(xuán)浮(fú)微(wēi)粒采(cǎi)樣量(liáng)的(dí)規(guī)定(dìng)是(shì)
：每次(cì)采樣的小采樣(yàng)量(liáng)100級(jí)區域為5.66L，以下各級(jí)區域為(wéi)2.83L
。關於(yú)浮遊菌(jūn)的(dí)測(cè)試，GB 50333-2002的規定如下表所(suǒ)列
：

4，檢測與監測(cè)的頻率(shuài)
生物汙染受(shòu)控(kòng)環(huán)境(jìng)的檢(jiǎn)測與(yǔ)潔淨室(shì)的檢測相(xiāng)類似(sì)，在建設與(yǔ)常(cháng)規運(yùn)行(háng)過(guò)程(chéng)中應有以下的(dí)檢測計劃(huá)
。
（1）竣工(gōng)驗(yàn)收檢(jiǎn)測
；
（2）生(shēng)物潔淨(jìng)室(shì)綜合(hé)性(xìng)能(néng)評價
；
（3）定(dìng)期監測
。
此外，發生(shēng)以(yǐ)下情況時(shí)需要(yào)額外(wài)安(ān)排檢測(cè)或(huò)調整監測頻(pín)率(shuài)，其中(zhōng)有(yǒu)些情況也(yě)是生物汙(wū)染(rǎn)受(shòu)控(kòng)環境(jìng)所*的
。
（1）生物(wù)汙染受(shòu)控環境連續(xù)超過報警值或動作值，需立(lì)即進行幹(gān)預(yù)，以(yǐ)查明(míng)原(yuán)因(yīn)並(bìng)采取糾(jiū)正(zhèng)措(cuò)施
。
（2）生物(wù)潔(jié)淨室長期停運之(zhī)後，在(zài)正(zhèng)式(shì)啟用之前需(xū)進(jìn)行(háng)檢(jiǎn)測
。
（3）在(zài)危(wēi)險(xiǎn)區檢(jiǎn)測(cè)到傳染(rǎn)媒(méi)介時
。
（4）對通(tōng)風空調(tiáo)淨(jìng)化(huà)係(xì)統進(jìn)行(háng)重大維護工(gōng)作之(zhī)後
。
（5）對(duì)生物(wù)潔淨(jìng)環境產(chǎn)生(shēng)影響的工藝變更(gēng)之(zhī)後
。
（6）改(gǎi)變(biàn)清(qīng)潔(jié)或消毒方法之(zhī)後(hòu)
。
（7）可(kě)能會(huì)造成(chéng)生物汙染(rǎn)的(dí)意外事故(gù)發生之(zhī)後
。
5，樣品處理(lǐ)與培養
這(zhè)也(yě)是生(shēng)物汙染(rǎn)受(shòu)控(kòng)環境有(yǒu)別於工(gōng)業潔(jié)淨室（ICR）檢(jiǎn)測(cè)的主(zhǔ)要(yào)方(fāng)麵(miàn)
。截止目(mù)前，生(shēng)物(wù)汙染受控(kòng)環境普遍采用的(dí)檢(jiǎn)測方(fāng)法，其(qí)采樣(yàng)都要經過(guò)一定時(shí)間(jiān)的(dí)培養(yǎng)才能得出結果
。正因為如此，對(duì)生(shēng)物(wù)潔(jié)淨室的(dí)采(cǎi)樣要格外(wài)細心，避免(miǎn)差(chà)錯，通(tōng)常(cháng)要注(zhù)意以下幾個方麵
：
（1）樣(yàng)品(pǐn)標(biāo)識
1）每個采樣的樣品(pǐn)都(dū)應包(bāo)含以(yǐ)下信息，以(yǐ)便(biàn)在獲得培(péi)養(yǎng)數(shù)據(jù)後，為正(zhèng)確(què)分析檢(jiǎn)測結果(guǒ)提(tí)供可靠(kào)的依據
。
2）采(cǎi)集日(rì)期(qī)和(hé)時間
。
3）采(cǎi)集(jí)當時進(jìn)行的活動(dòng)以(yǐ)及偏(piān)離(lí)采樣計劃(huá)之(zhī)處
。
4）采樣(yàng)人
。
5）培(péi)養(yǎng)基(jī)類(lèi)型(xíng)
。
（2）樣品處(chǔ)理方法(fǎ)
樣品(pǐn)從各采樣點收集後，要運送到集(jí)中培養處，在運(yùn)輸或(huò)處(chǔ)理(lǐ)過程中(zhōng)不(bù)應影響(xiǎng)所(suǒ)采(cǎi)集到(dào)的(dí)微生物(wù)的活(huó)性(xìng)與數(shù)量(liáng)，以(yǐ)下方麵應予以注(zhù)意
：
1）運輸和儲存(cún)的條件(jiàn)是(shì)否(fǒu)適宜(yí)，進入正(zhèng)式培養(yǎng)前的時間是否(fǒu)偏長(cháng)
。
2）中(zhōng)和(hé)介(jiè)質和(hé)滲(shèn)透(tòu)稀(xī)釋(shì)液(yè)的正確使用
。
（3）樣品培養(yǎng)
培養基是(shì)按照(zhào)所選定的(dí)微(wēi)生(shēng)物(wù)種類，並根(gēn)據采樣(yàng)環境，采(cǎi)樣方法及所使(shǐ)用的(dí)設(shè)備來確定的(dí)，不(bù)同微生物及培養基的(dí)培養(yǎng)條(tiáo)件(jiàn)有所(suǒ)不(bù)同(tóng)
。
為了(liǎo)保證(zhèng)采樣與培養(yǎng)的結果有(yǒu)效，培(péi)養基(jī)的品質(zhì)十分關鍵(jiàn)
。除了其組分(fēn)，性(xìng)能的(dí)可靠外，培養(yǎng)基容器外(wài)表麵(miàn)的(dí)潔淨(jìng)度十(shí)分(fēn)重(zhòng)要(yào)，通常(cháng)需要(yào)二層或(huò)三(sān)層包裝
。如(rú)有可(kě)能(néng)，在選(xuǎn)擇(zé)培養基(jī)的培養溫度(dù)和(hé)時(shí)間時(shí)，要(yào)考慮對預期(qī)采(cǎi)集到的微(wēi)生(shēng)物有利的生長條(tiáo)件(jiàn)
。