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空(kōng)氣中懸(xuán)浮微生(shēng)物的(dí)測定有多(duō)種(zhǒng),但其(qí)測(cè)定(dìng)的(dí)基本過程都(dū)是(shì)經過捕集(jí)-培(péi)養-計(jì)數的過程。目前(qián)普遍采用的(dí)是(shì)浮(fú)遊菌(jūn)和沉(chén)降菌(jūn)的測試方法(fǎ)。浮(fú)遊菌(jūn)測試(shì)方(fāng)法(fǎ)是(shì)通過收集懸浮(fú)在(zài)空氣(qì)中(zhōng)的(dí)生物粒子(zǐ)於(yú)專門(mén)的(dí)培養基平(píng)皿(mǐn),經若(ruò)幹(gān)時間(jiān)在(zài)適(shì)宜(yí)的生長(cháng)條(tiáo)件下讓其(qí)繁殖(zhí)到可(kě)見的(dí)菌落進(jìn)行(háng)計(jì)數,以此來(lái)判(pàn)定潔淨環境內單位體積空(kōng)氣中的活微(wēi)生(shēng)物數。沉(chén)降菌(jūn)測(cè)試(shì)方(fāng)法(fǎ)是(shì)通(tōng)過自然沉(chén)降(jiàng)原(yuán)理收(shōu)集(jí)在空氣(qì)中的(dí)生(shēng)物(wù)粒子於培(péi)養基平(píng)皿,經若(ruò)幹時間(jiān),在適宜(yí)的(dí)條(tiáo)件下(xià)讓(ràng)其(qí)繁(fán)殖到(dào)可見的菌落進(jìn)行計(jì)數,以(yǐ)平(píng)板培養皿中的菌落數來判定潔(jié)淨(jìng)環(huán)境內的活微生物數。
1,檢(jiǎn)測要(yào)求
(1)檢(jiǎn)測(cè)前(qián),被測潔(jié)淨(jìng)室(shì)的(dí)運行(háng)狀態必(bì)須(xū)在正常狀(zhuàng)態,其溫(wēn)度(dù),濕度,風(fēng)量,風壓(yā)及風(fēng)速必(bì)須(xū)在控(kòng)製(zhì)的(dí)規定值(zhí)內;被(bèi)測試的潔(jié)淨室(shì)(區)應已(yǐ)進行(háng)過消毒(dú);同(tóng)時(shí),潔(jié)淨(jìng)室的測試(shì)狀(zhuàng)態必須符合(hé)生產工藝的要求(qiú),並在測試(shì)報(bào)告中注(zhù)明其(qí)測試(shì)狀態。
(2)測(cè)試(shì)人(rén)員(yuán)必(bì)須(xū)穿戴潔淨服,而且(qiě)一(yī)般不得超過兩個人。
(3)淨(jìng)化(huà)空調係統(tǒng)正(zhèng)常運(yùn)轉時間,對單(dān)向流(liú)如5級(100級)潔(jié)淨室或層(céng)流工(gōng)作(zuò)台(tái)不得少(shǎo)於10min;對(duì)非單(dān)向流(liú)如(rú)7級(10000級), 8級(100000級(jí))的潔淨室不(bù)得少(shǎo)於30min。
(4)采(cǎi)樣點的(dí)布置(zhì)及要(yào)求:
a.浮(fú)遊(yóu)菌測試(shì)時,采(cǎi)樣點(diǎn)位置(zhì)可(kě)以與懸浮(fú)粒(lì)子(zǐ)測(cè)試(shì)點相同。工(gōng)作區測點位(wèi)置距(jù)地(dì)麵(miàn)0.8~1.5m(略(lüè)高(gāo)於工作(zuò)麵);送風口(kǒu)測點位置距送風(fēng)麵30cm左右(yòu)。根據需要可(kě)在關鍵(jiàn)設(shè)備或關鍵(jiàn)工作(zuò)活動範圍(wéi)處增加(jiā)測(cè)點(diǎn)。采(cǎi)樣點的(dí)布置(zhì)應力求均匀(yún),避免(miǎn)局部(bù)區域(yù)過於(yú)集(jí)中或(huò)稀疏(shū)。
b.沉降菌測試時(shí),采樣(yàng)點的(dí)位置可以與懸(xuán)浮粒子測試點(diǎn)相(xiāng)同(tóng)。工(gōng)作區(qū)采樣點的位置距地(dì)麵0.8~1.5m(略高於工作(zuò)麵);根據需要(yào)可在關(guān)鍵設(shè)備(bèi)或關(guān)鍵工作(zuò)活動範(fàn)圍(wéi)處(chǔ)增加測點(diǎn),采(cǎi)樣(yàng)點(diǎn)的布置應力(lì)求均(jūn)匀(yún)。
2,檢測方法
(1)浮(fú)遊菌(jūn)的檢(jiǎn)測方(fāng)法(fǎ)
1)首(shǒu)先(xiān)應對測(cè)試儀器(qì),培養皿表麵(miàn)進(jìn)行(háng)嚴格(gé)消毒。采樣器(qì)進(jìn)入被測房間前先(xiān)用消毒(dú)房(fáng)間的消(xiāo)毒劑(jì)滅菌,用於100級潔(jié)淨(jìng)室(shì)的采(cǎi)樣(yàng)器宜(yí)一(yī)直放(fàng)在被測(cè)房間內;用(yòng)消(xiāo)毒劑(jì)擦(cā)淨(jìng)培(péi)養皿的(dí)外(wài)表(biǎo)麵,把采樣器(qì)的(dí)頂蓋(gài),轉盤以(yǐ)及(jí)罩子內外(wài)消(xiāo)毒(dú)幹(gān)淨;采樣口(kǒu)及(jí)采(cǎi)樣管在使用(yòng)前必(bì)須(xū)高(gāo)溫滅(miè)菌。
2)采樣(yàng)者應穿戴與被測(cè)潔淨(jìng)室(shì)相應的潔(jié)淨服,在轉盤上放入或調(tiáo)換培(péi)養(yǎng)皿(mǐn)前,雙手要(yào)用消毒劑消毒(dú)。
3)開動真(zhēn)空泵抽(chōu)氣(qì),使儀器中的殘餘消毒(dú)劑(jì)蒸發, 時間不少於(yú)5min,並調好流量(liáng),轉盤(pán)轉速(sù)。
4)關(guān)閉(bì)真空(kōng)泵(bèng),放(fàng)入培(péi)養(yǎng)皿,蓋(gài)好(hǎo)蓋子後調節(jié)采樣器(qì)。
5)置(zhì)采樣口(kǒu)於(yú)采樣(yàng)點後(hòu),依(yī)次開啟采樣器,真(zhēn)空(kōng)泵,轉動(dòng)定時(shí)器,根據采樣量選(xuǎn)定采樣時間(jiān)。
6)全部(bù)采樣結束後,將培(péi)養(yǎng)皿倒置於30~35℃恒(héng)溫(wēn)培養箱中(zhōng)培養,時間(jiān)不少(shǎo)於45h。
7)用(yòng)肉眼直接計(jì)數(shù),然(rán)後用(yòng)5~10倍放大鏡檢查,是(shì)否有(yǒu)遺漏。若(ruò)平(píng)板上(shàng)有兩個(gè)或兩(liǎng)個(gè)以上(shàng)的菌(jūn)落重疊,分辨(biàn)時(shí)仍以兩個或(huò)兩(liǎng)個(gè)以(yǐ)上菌(jūn)落(là)計(jì)數(shù)。
(2)沉降菌(jūn)檢測方法(fǎ)
1)首先(xiān)也(yě)是(shì)對測試儀(yí)器,培養皿表麵(miàn)進行(háng)嚴格消(xiāo)毒(dú)滅(miè)菌,在(zài)37℃恒(héng)溫(wēn)培(péi)養箱中培養48h觀(guān)察(chá),確信(xìn)無菌(jūn)後(hòu)方可(kě)使(shǐ)用(yòng)。
2)一(yī)般用Ø90mm的沉(chén)降平皿(mǐn),注人20mL培養基(jī),放在測點處(chǔ),開蓋暴露30min,將培(péi)養皿蓋蓋上後倒(dǎo)置(zhì)。然後(hòu)在(zài)30~35℃恒(héng)溫(wēn)培養箱中(zhōng)經(jīng)48h培養為肉(ròu)眼計菌(jūn)落(là)數,並記(jì)錄生成(chéng)的(dí)菌(jūn)落(là)數CFU,然後用5~10 倍放大(dà)鏡檢查,是否(fǒu)有(yǒu)遺(yí)漏。若培養(yǎng)皿上有兩個或兩個以上(shàng)的(dí)菌落重(zhòng)疊(dié),分辨時(shí)仍(réng)以(yǐ)兩個(gè)或兩個(gè)以上菌落計數。
3,檢(jiǎn)測儀(yí)器
(1)浮(fú)遊菌(jūn)測試儀(yí)器(qì)
1)儀器(qì)設(shè)備(bèi)主要(yào)有采(cǎi)樣器,真(zhēn)空抽(chōu)氣泵,培養皿(mǐn),恒溫培養(yǎng)箱等。
2)微(wēi)生物采樣器有多種形式(shì),主要有固(gù)體(tǐ)撞(zhuàng)擊式采(cǎi)樣器,離(lí)心式空氣(qì)微生(shēng)物(wù)采(cǎi)樣器,氣旋式微生物氣(qì)溶膠采樣器,液(yè)體衝擊式微(wēi)生物氣(qì)溶膠采(cǎi)樣器(qì),過濾式微生(shēng)物(wù)氣(qì)溶膠(jiāo)采樣(yàng)器(qì),大容量靜(jìng)電(diàn)沉降(jiàng)采(cǎi)樣(yàng)器等(děng)。采樣器的(dí)選(xuǎn)擇(zé)應(yīng)考慮采樣(yàng)器的靈敏度(dù),采樣(yàng)效(xiào)率(shuài),以及有(yǒu)利於微生(shēng)物(wù)的存(cún)活,易於分析粒(lì)子大(dà)小(xiǎo), 易(yì)於操(cāo)作(zuò)和(hé)使用方便等因素。浮遊菌采樣器(qì)一般采(cǎi)用狹(xiá)縫(féng)式(shì)采樣(yàng)器(qì)和(hé)離心(xīn)式采樣器(qì)。
3)狹縫式采(cǎi)樣(yàng)器(撞擊(jī)式(shì)采樣器(qì))。各類狹縫式采(cǎi)樣器工(gōng)作原理都(dū)相同。將(jiāng)采集(jí)的(dí)微生(shēng)物氣溶膠噴射到緩(huǎn)慢(màn)旋轉的(dí)撞(zhuàng)擊板(bǎn)或固體培養基表(biǎo)麵上,具(jù)有足夠(gòu)大(dà)運(yùn)量的粒(lì)子撞擊(jī)到收集(jí)板上,而較小粒子由於慣(guàn)性(xìng)小在(zài)氣流夾攜下流出(chū)。每種(zhǒng)型號(hào)的(dí)撞擊式(shì)采樣器都(dū)有(yǒu)其自身(shēn)的(dí)收(shōu)集效率。例(lì)如國(guó)產的(dí)THK-201型(xíng)采樣(yàng)器(qì),屬於固體(tǐ)慣性撞(zhuàng)擊式,打(dǎ)開(kāi)電(diàn)源後(hòu)用(yòng)真(zhēn)空抽(chōu)氣(qì),懸浮於空氣中(zhōng)的(dí)帶(dài)菌粒子被(bèi)吸入采樣頭(tóu)的篩孔篩,該采樣(yàng)器的(dí)特點是采樣(yàng)頭篩孔隙(xì)是(shì)可調的,當空隙調(tiáo)小(xiǎo)時,可(kě)用(yòng)於(yú)采集較小粒子;若(ruò)要(yào)采(cǎi)集大粒(lì)子時(shí),可將(jiāng)空隙調大,從(cóng)而增(zēng)大(dà)了采樣器的應(yīng)用範圍。
4)離(lí)心式采樣(yàng)器基於離(lí)心撞擊原理,當(dāng)采(cǎi)樣器通電後,借(jiè)助於蝸殼內的葉輪高(gāo)速(sù)旋轉(zhuǎn),能(néng)把至少(shǎo)40cm距離以(yǐ)內被(bèi)測(cè)的帶菌(jūn)空氣(qì)吸(xī)入(rù),在(zài)離(lí)心力的(dí)作用(yòng)下(xià),空(kōng)氣中的活微生(shēng)物粒子(zǐ)加速撞(zhuàng)擊到的培養基條上(shàng),采樣(yàng)後的培(péi)養(yǎng)基(jī)條從蝸(wō)殼中取(qǔ)出,經過恒(héng)溫,定(dìng)時(shí)培養(yǎng),形(xíng)成菌落(là),然後(hòu)進行(háng)菌(jūn)落計數。國(guó)內研製(zhì)生產的JWC-1型采樣(yàng)器便是一種(zhǒng)性能(néng)較好(hǎo)的離心(xīn)式(shì)空(kōng)氣微生物(wù)采(cǎi)樣(yàng)器(qì),采(cǎi)樣(yàng)量為(wéi)40L/min。
(2)沉降(jiàng)菌測(cè)試所用(yòng)的(dí)儀器設(shè)備
主(zhǔ)要有(yǒu)高壓(yā)消(xiāo)毒鍋(guō),恒溫培(péi)養箱,培(péi)養皿。培(péi)養(yǎng)皿一(yī)般采(cǎi)用Ø90mm*15mm的硼矽(guī)酸(suān)玻(bō)璃培養(yǎng)皿(mǐn),培(péi)養基采用普(pǔ)通(tōng)肉(ròu)瓊脂培養(yǎng)基或《中華(huá)人民共和(hé)國藥(yào)典》認(rèn)可的(dí)其他(tā)培養基。
4,合格(gé)標準(zhǔn)
國(guó)內外有(yǒu)關(guān)浮遊(yóu)菌(jūn)測定(dìng)的(dí)標準:
國內(nèi)外(wài)有關沉(chén)降(jiàng)菌測定的標準: