1，無菌(jūn)室應設(shè)有無菌操(cāo)作間(jiān)和緩(huǎn)衝間，無(wú)菌操(cāo)作(zuò)間潔(jié)淨(jìng)度(dù)應達(dá)到10000級，室(shì)內溫度保持在20-24℃，濕(shī)度保(bǎo)持(chí)在45-60%。超淨台潔(jié)淨(jìng)度(dù)應達(dá)到(dào)100級。
2，無菌(jūn)室(shì)應保持(chí)清(qīng)潔，嚴禁堆(duī)放(fàng)雜物，以(yǐ)防汙(wū)染(rǎn)。
3，嚴(yán)防(fáng)一切滅菌器(qì)材和(hé)培養基(jī)汙染，已汙染(rǎn)者應停止(zhǐ)使用(yòng)。
4，無菌(jūn)室(shì)應備有工作(zuò)濃度的消毒液(yè)，如5％的甲酚(fēn)溶液，70％的酒精(jīng)，0.1％的新潔爾滅(miè)溶液，等(děng)等(děng)。
5，無菌室(shì)應(yīng)定期用(yòng)適宜(yí)的消毒(dú)液滅菌清(qīng)潔(jié)，以(yǐ)保(bǎo)證無菌室的潔(jié)淨度符(fú)合要求。
6，需要帶(dài)入(rù)無菌室(shì)使用的儀器，器械(xiè)，平皿等一切(qiē)物(wù)品，均應(yīng)包(bāo)紮(zā)嚴(yán)密(mì)，並(bìng)應(yīng)經過適(shì)宜的(dí)方(fāng)法滅菌(jūn)。
7，工(gōng)作人(rén)員進(jìn)入無(wú)菌(jūn)室前，必(bì)須用肥(féi)皂(zào)或(huò)消(xiāo)毒(dú)液(yè)洗手消(xiāo)毒，然後(hòu)在緩衝間更換工(gōng)作服(fú)，鞋，帽(mào)子(zǐ)，口罩和手套(tào)（或(huò)用70%的乙醇再(zài)次擦(cā)拭雙手），方可(kě)進入(rù)無菌(jūn)室進行(háng)操作(zuò)。
8，無菌室使用(yòng)前必須打(dǎ)開無菌室的(dí)紫(zǐ)外燈輻(fú)照(zhào)滅(miè)菌(jūn)30分(fēn)鐘以上(shàng)，並且同時打開超淨台進行吹(chuī)風。操(cāo)作完畢，應(yīng)及時(shí)清(qīng)理(lǐ)無(wú)菌室，再用(yòng)紫外(wài)燈輻照滅菌20分鐘。
9，供試品在檢查(chá)前，應保持外(wài)包(bāo)裝(zhuāng)完整，不(bù)得(dé)開(kāi)啟，以防(fáng)汙(wū)染(rǎn)。檢查前，用(yòng)70％的酒精(jīng)棉(mián)球消毒外表麵。
10，每次(cì)操作(zuò)過(guò)程(chéng)中，均(jūn)應做(zuò)陰性對(duì)照(zhào)，以檢查無菌操(cāo)作的可(kě)靠性。
11，吸(xī)取菌(jūn)液(yè)時，必須用(yòng)吸(xī)耳球(qiú)吸取，切勿直接(jiē)用口接(jiē)觸(chù)吸(xī)管。
12，接種針每(měi)次使用前(qián)後，必須(xū)通過火焰(yàn)灼燒滅(miè)菌，待冷卻後(hòu)，方可(kě)接種(zhǒng)培養(yǎng)物(wù)。
13，帶(dài)有(yǒu)菌(jūn)液的吸管，試管(guǎn)，培養皿等(děng)器皿應(yīng)浸(jìn)泡在盛有5%來蘇爾溶(róng)液(yè)的(dí)消毒桶內消(xiāo)毒，24小(xiǎo)時後(hòu)取(qǔ)出衝洗。
14，如有(yǒu)菌液(yè)灑在桌上或(huò)地上(shàng)，應立(lì)即(jí)用5%石碳酸溶液或3％的(dí)來(lái)蘇爾傾(qīng)覆在(zài)被(bèi)汙染處(chǔ)至少(shǎo)30分鐘，再做處(chǔ)理(lǐ)。工作衣帽(mào)等受(shòu)到(dào)菌(jūn)液汙(wū)染時(shí)，應(yīng)立即(jí)脫(tuō)去(qù)，高壓蒸(zhēng)汽(qì)滅菌(jūn)後洗滌(dí)。
15，凡(fán)帶(dài)有(yǒu)活菌的物(wù)品(pǐn)，必(bì)須經消(xiāo)毒(dú)後(hòu)，才(cái)能在水下衝(chōng)洗，嚴禁汙染下水道(dào)。
16，無(wú)菌室(shì)應每月檢查(chá)菌落(là)數。在(zài)超(chāo)淨(jìng)工(gōng)作台開啟的(dí)狀(zhuàng)態下，取(qǔ)內徑(jìng)90mm的無(wú)菌培養皿若(ruò)幹，無菌(jūn)操作(zuò)分別注入(rù)融化並冷(lěng)卻至約45℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培(péi)養基(jī)約15ml，放至(zhì)凝(níng)固後(hòu)，倒(dǎo)置(zhì)於30～35℃培養箱培養48小時(shí)，證(zhèng)明無菌(jūn)後，取平板3～5個，分別(bié)放(fàng)置工(gōng)作(zuò)位(wèi)置的(dí)左(zuǒ)中右等處，開(kāi)蓋暴(bào)露(lòu)30分(fēn)鐘(zhōng)後，倒置(zhì)於(yú)30～35℃培養(yǎng)箱培養48小時，取出(chū)檢(jiǎn)查。100級潔(jié)淨(jìng)區(qū)平(píng)板(bǎn)雜菌數平均不(bù)得超(chāo)過1個菌落(là)，10000級(jí)潔(jié)淨室(shì)平均(jūn)不得(dé)超(chāo)過3個菌(jūn)落。如(rú)超(chāo)過(guò)限度(dù)，應(yīng)對無(wú)菌室進行(háng)*消(xiāo)毒，直至(zhì)重復檢查(chá)合(hé)乎(hū)要(yào)求(qiú)為(wéi)止。