1，無菌室應設有(yǒu)無(wú)菌(jūn)操作間和(hé)緩衝間(jiān)，無菌操作(zuò)間潔淨(jìng)度應達到(dào)10000級，室(shì)內溫度(dù)保(bǎo)持(chí)在(zài)20-24℃，濕(shī)度(dù)保(bǎo)持(chí)在45-60%。超潔(jié)淨(jìng)工作台(tái)潔(jié)淨度(dù)應(yīng)達到(dào)100級(jí)。
2，無菌室(shì)應保(bǎo)持清潔，嚴禁堆放雜物，以防汙染(rǎn)。
3，嚴(yán)防(fáng)一(yī)切滅(miè)菌(jūn)器材和(hé)培養(yǎng)基汙(wū)染，已汙染者應停(tíng)止使用(yòng)。
4，無菌室應(yīng)備(bèi)有(yǒu)工(gōng)作濃度(dù)的消毒液，如5％的(dí)甲(jiǎ)酚溶液，70％的酒精，0.1％的新潔(jié)爾(ěr)滅(miè)溶(róng)液(yè)，等等(děng)。
5，無(wú)菌室(shì)應定期(qī)用適宜(yí)的消毒液(yè)滅菌清(qīng)潔，以保證(zhèng)無菌(jūn)室的(dí)潔淨(jìng)度符合要(yào)求(qiú)。
6，需(xū)要帶入(rù)無(wú)菌(jūn)室(shì)使(shǐ)用的儀器，器(qì)械(xiè)，平(píng)皿(mǐn)等一切物(wù)品(pǐn)，均應包紮嚴密，並(bìng)應經過(guò)適宜的方(fāng)法滅菌。
7，工作人員(yuán)進(jìn)入(rù)無菌室前(qián)，必(bì)須用(yòng)肥皂(zào)或消毒(dú)液洗手(shǒu)消(xiāo)毒，然(rán)後(hòu)在(zài)緩衝(chōng)間(jiān)更換(huàn)工(gōng)作(zuò)服(fú)，鞋(xié)，帽(mào)子，口(kǒu)罩和手(shǒu)套(或用(yòng)70%的乙醇再次(cì)擦拭(shì)雙(shuāng)手)，方可進(jìn)入無菌室(shì)進(jìn)行操作。
8，無(wú)菌室使用前必須打(dǎ)開(kāi)無菌室的紫外(wài)燈(dēng)輻(fú)照滅菌30分鐘以(yǐ)上，並且(qiě)同時打開(kāi)超(chāo)淨台進行(háng)吹風(fēng)。操作(zuò)完(wán)畢(bì)，應及時清(qīng)理無菌室，再用紫外燈輻(fú)照滅菌(jūn)20分(fēn)鐘。
9，供試(shì)品(pǐn)在檢查前(qián)，應保持外包(bāo)裝(zhuāng)完整，不(bù)得開啟，以防(fáng)汙染(rǎn)。檢(jiǎn)查前(qián)，用70％的(dí)酒精棉球消(xiāo)毒外表麵。
10，每(měi)次(cì)操(cāo)作(zuò)過程中(zhōng)，均應做陰性對照(zhào)，以檢查無菌(jūn)操作的可靠性(xìng)。
11，吸(xī)取(qǔ)菌液時，必須(xū)用(yòng)吸耳球吸取(qǔ)，切勿(wù)直接(jiē)用(yòng)口接(jiē)觸(chù)吸(xī)管(guǎn)。
12，接(jiē)種(zhǒng)針每(měi)次使用(yòng)前(qián)後(hòu)，必(bì)須通過火(huǒ)焰灼燒(shāo)滅(miè)菌(jūn)，待冷卻後，方可接(jiē)種(zhǒng)培養物。
13，帶有菌液的吸管(guǎn)，試(shì)管(guǎn)，培(péi)養(yǎng)皿等(děng)器(qì)皿(mǐn)應浸(jìn)泡(pào)在盛有5%來(lái)蘇(sū)爾溶液的消毒桶(tǒng)內(nèi)消(xiāo)毒，24小時後取出衝洗(xǐ)。
14，如有(yǒu)菌液(yè)灑(sǎ)在桌(zhuō)上或(huò)地上，應(yīng)立(lì)即用(yòng)5%石碳酸溶(róng)液(yè)或3％的來(lái)蘇爾傾覆(fù)在被汙(wū)染(rǎn)處至(zhì)少30分(fēn)鐘(zhōng)，再(zài)做處理。工作(zuò)衣帽等(děng)受(shòu)到(dào)菌(jūn)液汙染時，應立(lì)即(jí)脫(tuō)去，高(gāo)壓(yā)蒸汽滅菌後(hòu)洗滌(dí)。
15，凡帶有活菌的(dí)物(wù)品(pǐn)，必須經(jīng)消毒(dú)後，才能在水(shuǐ)下衝(chōng)洗，嚴禁(jīn)汙染(rǎn)下(xià)水(shuǐ)道(dào)。
16，無菌室(shì)應(yīng)每月檢查(chá)菌落(là)數。在超(chāo)淨工(gōng)作台(tái)開啟(qǐ)的狀(zhuàng)態下，取(qǔ)內徑90mm的無菌培養皿(mǐn)若幹，無(wú)菌操(cāo)作(zuò)分(fēn)別(bié)注(zhù)入融化並冷(lěng)卻至約(yuē)45℃的(dí)營養瓊(qióng)脂培(péi)養(yǎng)基約15ml，放至凝固後，倒(dǎo)置於30～35℃培(péi)養箱(xiāng)培養48小時，證明無(wú)菌後，取平(píng)板3～5個(gè)，分別(bié)放置(zhì)工作位置(zhì)的左中右等(děng)處，開蓋(gài)暴(bào)露30分(fēn)鐘後，倒置(zhì)於(yú)30～35℃培(péi)養箱培養48小時，取出(chū)檢查。100級(jí)潔(jié)淨區平(píng)板(bǎn)雜(zá)菌數(shù)平均不得超(chāo)過(guò)1個菌(jūn)落(là)，10000級(jí)潔淨室平(píng)均不(bù)得(dé)超過3個菌落。如超過(guò)限度(dù)，應(yīng)對無(wú)菌室進(jìn)行*消(xiāo)毒(dú)，直至重(zhòng)復檢(jiǎn)查(chá)合乎要求(qiú)為止(zhǐ)。